Hi, I am an happy lightbox
|
|
|
|
|
|
|
|
++ 32 (0)81 25 50 50
EN | NL | FR LOGIN   
PRODUCTS SECTORS SERVICES BRANDS
PRODUCTS
SECTORS
SERVICES
BRANDS
   
test tool 1 test tool 2
ANALIS

Protur™HiSi kit for Beckman Coulter Paragon® Electrophoresis - GR: Instructions for use

QUOTATION
INFORMATION
QUOTATION
INFORMATION
DESCRIPTION
DESCRIPTION

1. General

Date: 4 sep-03 - Revision: 01
EURO PN 844111009
PN 10-004100
100 αναλύσεις ανά κιτ

figure 1

2. Προβλεπόμενη χρήση

Το κιτ αυτό προορίζεται για τον ηλεκτροφορητικό διαχωρισμό πρωτεϊνών σε μη συμπυκνωμένα ούρα.

3. Αρχή της ανάλυσης

Όταν βρεθούν μέσα σε ηλεκτρικό πεδίο, οι πρωτεΐνες μετακινούνται προς ένα από τα ηλεκτρόδια των πόλων με διαφορετική ταχύτητα. Κατά τη μετακίνηση, οι πρωτεΐνες διαχωρίζονται. Μετά τη μετακίνηση, οι πρωτεΐνες χρωματίζονται με χρωστική ειδική για πρωτεΐνες, για την οπτική ερμηνεία μέσω σύγκρισης με μια γνωστή κατανομή αναφοράς (δείγμα ελέγχου).

Για τον εντοπισμό της θέσης των κλασμάτων μπορεί να χρησιμοποιηθεί ένας μάρτυρας (εσωτερικό πρότυπο).

4. Περιεχόμενο

Ρυθμιστικό διάλυμα εξισορρόπησης (ρυθμιστικό διάλυμα TRIS-βορικού 0,64 mol/L) 1x200 mL (PN 10-004101)


Ρυθμιστικό διάλυμα ηλεκτροφόρησης (ρυθμιστικό διάλυμα TRIS-βορικού 3,2 mol/L) 1x200 mL (PN 10-004102)


Χρωστική Protur 1x100 mL (PN 10-004064)


Πηκτώματα αγαρόζης : 1x10


Μήτρες δειγμάτων (μωβ) - 1x10


Ογκομετρικό δοχείο (25 mL) 1x


Στυπόχαρτα μήτρας 1x 10 (19 x 126 mm)


Στυπόχαρτα πηκτώματος 1x 20 (83x101 mm)

Εάν χρησιμοποιηθεί μάρτυρας ως εσωτερικό πρότυπο: προσθέστε 5 μL διαλύματος I.S. (εσωτερικό πρότυπο αναφοράς 10-004109) σε 100 μL ούρων.

5. Διαμόρφωση του οργάνου

- Βλ. Σύστημα ηλεκτροφόρησης Paragon® της Beckman Coulter.

6. Άλλα απαιτούμενα αντιδραστήρια και υλικά

  • Πιπέτες.

- Ογκομετρικός κύλινδρος.

- Απιονισμένο νερό.

- Διάλυμα οξέος-αλκοόλης.

- Αλατούχο διάλυμα.

- Σύστημα ηλεκτροφόρησης Paragon® της Beckman Coulter.

Εάν χρησιμοποιηθεί εσωτερικό πρότυπο:

- Μάρτυρας (εσωτερικό πρότυπο) 1 mL, κωδικός αναφοράς 10-004109

7. Εκπαίδευση

Ο χειριστής θα πρέπει να είναι εξοικειωμένος με το σύστημα ηλεκτροφόρησης Paragon® της Beckman Coulter.

8. Παρασκευή και φύλαξη αντιδραστηρίων

Πηκτώματα αγαρόζης: Λίγο πριν τη χρήση, αφαιρέστε προσεκτικά ένα πήκτωμα από το περίβλημα αλουμινίου. Τα πηκτώματα θα πρέπει να φυλάσσονται σε θερμοκρασία δωματίου (8°C έως 30°C) μέχρι την ημερομηνία λήξης. Η φύλαξη υπό ακατάλληλη θερμοκρασία ή ακατάλληλες συνθήκες μπορεί να οδηγήσει σε άτυπους ρυθμούς μετακίνησης. ΜΗΝ ΑΠΟΘΗΚΕΥΕΤΕ ΤΑ ΠΗΚΤΩΜΑΤΑ ΚΟΝΤΑ ΣΕ ΠΗΓΕΣ ΕΚΠΟΜΠΗΣ ΘΕΡΜΟΤΗΤΑΣ. Για παράδειγμα: οθόνες CRT, υπολογιστές ή επιτραπέζιες συσκευές. ΜΗΝ ΤΑ ΨΥΧΕΤΕ ΚΑΙ ΜΗΝ ΤΑ ΚΑΤΑΨΥΧΕΤΕ.

Ρυθμιστικό διάλυμα εξισορρόπησης Protur HiSi: ΕΤΟΙΜΟ ΓΙΑ ΧΡΗΣΗ.

Ρυθμιστικό διάλυμα ηλεκτροφόρησης Protur HiSi Αναμίξτε 200 mL ρυθμιστικού διαλύματος με 800 mL απιονισμένου νερού.

Το ρυθμιστικό διάλυμα είναι σταθερό επί 60 ημέρες εφόσον παραμένει σε κλειστό δοχείο.

Διάλυμα χρώσης Protur:

- παρασκευάστε διάλυμα οξέος-αλκοόλης: 500 mL απιονισμένου νερού,
300 mL μεθανόλης, 200 mL οξικού οξέος.

- αναμίξτε 100 mL διαλύματος χρωστικής με 200 mL διαλύματος οξέος-αλκοόλης.

Φυλάξτε τα αντιδραστήρια σε θερμοκρασία δωματίου

9. Είδος δείγματος


Χρησιμοποιήστε πρόσφατα μη συμπυκνωμένα ούρα.

10. Προετοιμασία του συστήματος

Βλ. Σύστημα ηλεκτροφόρησης Paragon®.

Τοποθετήστε σε σύστημα επεξεργασίας υγρών (wet processor):

  • δοχείο 1: διάλυμα χρωστικής (διάλυμα χρώσης)

  • δοχείο 2: απιονισμένο νερό

  • δοχείο 3: διάλυμα οξέος-αλκοόλης

  • δοχείο 4: διάλυμα οξέος-αλκοόλης

  • δοχείο 5: απιονισμένο νερό

ΕΠΑΝΑΧΡΗΣΙΜΟΠΟΙΗΣΙΜΟ ΓΙΑ 10 ΠΗΚΤΩΜΑΤΑ

11. Προετοιμασία δειγμάτων

Δεν απαιτείται καμία προετοιμασία των δειγμάτων.

Εάν χρησιμοποιηθεί μάρτυρας (εσωτερικό πρότυπο): προσθέστε 5 μL διαλύματος I.S. (εσωτερικό πρότυπο αναφοράς 10-004109) σε 100 μL ούρων.

12. Ενέργειες

Εξισορρόπηση


- Στυπώστε το πήκτωμα και προσθέστε 20 mL του ρυθμιστικού
διαλύματος εξισορρόπησης στο δίσκο πηκτώματος

  • Τοποθετήστε το πήκτωμα μέσα στο υγρό, με την αγαρόζη προς τα κάτω
  • Περιμένετε 30 λεπτά (μην κλείσετε το δοχείο)

Τοποθέτηση

  • Στυπώστε το πήκτωμα
  • Τοποθετήστε τη μήτρα δειγμάτων
  • Προσθέστε το δείγμα: ακριβώς 5 μL
  • Περιμένετε ωσότου ολόκληρη η ποσότητα του δείγματος έχει διαχυθεί μέσα στο πήκτωμα.
  • Αφαιρέστε και απορρίψτε τη μήτρα

Ηλεκτροφόρηση

  • Προσθέστε 45 mL ρυθμιστικού διαλύματος ηλεκτροφόρησης σε κάθε διαμέρισμα της κυψελίδας
  • Τοποθετήστε το πήκτωμα πάνω στη γέφυρα
  • Εκτελέστε διαχωρισμό επί 25 λεπτά υπό 100 Volt

Χρώση


- Υποβάλετε το πήκτωμα στην παρακάτω επεξεργασία:

o διάλυμα χρώσης (χρωστικής) - 10 min.

o απιονισμένο νερό - 10 min.

o διάλυμα οξέος-αλκοόλης - 1 min.

o διάλυμα οξέος-αλκοόλης - 1 min. (ή περισσότερο, μέχρι το φόντο να γίνει διαυγές)

o Σκουπίστε για να απομακρύνετε την περίσσεια του διαλύματος

  • Τοποθετήστε το πήκτωμα σε κλίβανο αποξήρανσης μέχρις
    ότου αποξηρανθεί πλήρως (μέγιστη θερμοκρασία 90°C)
  • Εξετάστε το πήκτωμα

13. Βαθμονόμηση

Δεν εφαρμόζεται.

14. Ανάλυση αποτελεσμάτων

figure 2

Εξετάστε το πήκτωμα, συγκρίνοντάς το με την κατανομή ενός γνωστού δείγματος αναφοράς (ελέγχου).

15. Υπολογισμός

Δεν εφαρμόζεται.

16. Επαναληψιμότητα

Δεν εφαρμόζεται.

17. Εύρος αναφοράς

Δεν εφαρμόζεται.

18. Παρεμβολές

Δεν υπάρχουν γνωστοί παράγοντες παρεμβολής.

19. Έλεγχος ποιότητας

Χρησιμοποιήστε δείγμα ελέγχου.

20. Βιβλιογραφία

1. Chopin N. Exploration biologique des protéinuries. Classification, méthodes d'investigation et interprétation. Spectra Biologie 1993;1:49-53
2. Chopin N, Le Carrer D. Etude de la sélectivité des protéinuries : description d'un nouvel index. Rev Fr Lab 1994;269:103-7
3. Chopin N, Le Carrer D. Exploration biologique des tubulopathies : mise à jour. Rev Fr Lab 1994;269:109-12
4. Le Carrer D, Nicolas A, Ducasse L. L'analyse des protéinuries au laboratoire de biologie en 1992. Rev Fr Lab 1992;245:41-7
5. Le Carrer D, Chopin N. Profil protéique urinaire : proposition d'un protocole d'exploration biologique des protéinuries. Rev Fr Lab 1994;269:29-37
6. Pourignaux F, Brohet M, Louis P, Chevigné R. News methods for detecting and identifying monoclonal and BJ proteins in urine without concentration. Sixth Int Symp of Nephrology, Montecatini Terme, Italy, June 1989
7. Van Hoof V, Chevigné R, Van Campenhout C, Lepoutre L. Evaluation of the Protur/Microprotur system  Beckman-Analis-Belgium for the protein electrophoresis of non-concentrated urine samples. 7ieme Coll Biologie Prospective, Pont à Mousson, 1988

Brochures:

B 25 E92 Analysis of Urinary Proteins by Electrophoresis without Concentration.

B 25a E97

B 46 D95 Urinproteinelektrophorese von nicht einkonzentrierten Urinproben.

B 38 F94 L'analyse des protéines urinaires par électrophorèse sans concentration.

B 39 E94 Urinary Proteins analysis by electrophoresis without concentration.

B 39a E96

B 45 D95 Elektrophoretische Urinproteinanalyse ohne Einkonzentrierung.

ANALIS website
This item belongs to the following categories (click to expand):
Prices are quoted in euro (taxes excluded) and apply in the Benelux (recycling fee included). They are subject to change without notice. We reserve the right to adjust pricing errors and to limit quantities.

FOLLOW US ON  FOLLOW US: