Hi, I am an happy lightbox
|
|
|
|
|
|
|
|
++ 32 (0)81 25 50 50
EN | NL | FR LOGIN   
PRODUCTS SECTORS SERVICES BRANDS
PRODUCTS
SECTORS
SERVICES
BRANDS
   
ANALIS

Microprotur™ kit for Beckman Coulter Paragon®Electrophoresis - ES: Instrucciones de uso

QUOTATION
INFORMATION
QUOTATION
INFORMATION
DESCRIPTION
DESCRIPTION

1. General

Fecha: 4-Sep-03 - Revisión: 01
EURO PN 844111003
PN 10-004070
100 pruebas por kit

figure 1

2. Uso previsto

Este estuche está diseñado para la separación electroforética de las proteínas en muestras no concentradas de orina.

3. Principio del ensayo

Cuando las proteínas se someten a un campo eléctrico, migran hacia uno de los polos en proporciones variables. La migración separa las proteínas. Tras la migración, las proteínas se tiñen con un colorante específico para su interpretación visual por comparación con un patrón de referencia conocido (control).

4. Contenido

Tampón Equilibrador (1,33 mol/l de tampón TRIS borato) 1x200ml (PN 10-004061)

Tampón Electroforético (2,22 mol/l de tampón TRIS borato) 1x200ml (PN 10-004062)

Tinción Protur 1x100mL (PN 10-004064)

Geles de agarosa: 10x

Revelador Microprotur (20 ml) 10-004073

Plantilla para la muestra - 10

Medida (25ml) 1x

Pipeta para líquidos (2,5 ml)

Secantes para plantillas 10 (19 x 126 mm)

Secantes para geles 40 (83x101mm)

Secantes absorbentes: 40 (76 x 101 mm)

5. Configuración del aparato

  • Véase el Sistema de electroforesis Beckman Coulter Paragon ®.

6. Otros reactivos y materiales necesarios

- Pipetas.

- Bureta graduada.

- Agua desionizada.

- Solución alcohol-ácido

- Solución de ácido acético al 10%

- Solución salina;

- Sistema de electroforesis Beckman Coulter Paragon ®

7. Formación

El operador deberá estar familiarizado con el Sistema de electroforesis Beckman Coulter Paragon®.

8. Preparación de reactivos y almacenamiento

Geles de agarosa: Inmediatamente antes de usarlo, sacar el gel de su envoltorio de aluminio cuidadosamente. Los geles deben almacenarse a temperatura ambiente entre 8°C y 30°C hasta su fecha de caducidad. Una temperatura o condiciones de almacenamiento inadecuadas pueden ocasionar migraciones atípicas. No almacene los geles cerca de dispositivos que emitan calor, como por ejemplo monitores, ordenadores, o instrumentos de sobremesa. NO REFRIGERAR NI CONGELAR.

Tampón Equilibrador Protur: Listo para usar.

Tampón de electroforesis Protur Mezclar 200ml de tampón con 800 ml de agua desionizada.

El tampón permanece estable en frasco cerrado durante 60 días.

Solución de ácido acético al 10%.

Solución para tinción Protur:

  • preparar la solución ácido-alcohol: 500 ml de agua desionizada, 300 ml de metanol, 200 ml de ácido acético.
  • mezclar 100 ml de colorante con 200 ml de solución ácido-alcohol.

Solución salina:

8,5 g de NaCl en 1 l de agua desionizada.

Almacenar los reactivos a temperatura ambiente

9. Tipo de muestra


Utilizar orina fresca no concentrada.

10. Preparación del equipo

Véase el sistema de electroforesis Paragon ®

Colocar en el procesador de líquidos:

  • contenedor 1: solución colorante

  • contenedor 2: solución de ácido acético

  • contenedor 3: solución ácido alcohol

  • contenedor 4: solución ácido alcohol

  • contenedor 5: agua desionizada

reutilizable para 10 geles

11. Preparación de la muestra

La muestra no requiere ninguna preparación previa.

12. Operaciones

Equilibrado

- Secar el gel y verter 20 ml de tampón equilibrador en la bandeja.

- Colocar el gel, con la agarosa hacia abajo, sobre el líquido.

- Esperar durante 30 minutos (no cerrar el contenedor)

Aplicación

- Secar el gel

- Colocar la plantilla para la muestra.

- Dispensar 5 µl de la muestra

- Esperar durante 5 minutos

- Secar suavemente la plantilla con el secante para plantillas

- Retirar y desechar el secante y la plantilla

Electroforesis

- Verter 45 ml de tampón de electroforesis en cada compartimiento de la celda

- Colocar el gel sobre el puente

- Separar durante 35 minutos a 100 voltios

Detección

- Colocar el gel en la caja de incubación

- Distribuir uniformemente 2 ml de revelador Microprotur sobre el gel con una pipeta para líquidos

- Incubar durante 30 min a temperatura ambiente

- Lavar en solución salina durante 10 min

- Colocar el secante para geles en el fondo de la secadora a presión

- Retirar el gel del marco para geles y colocar el gel, con el lado de la agarosa hacia arriba, sobre el secante para geles en el fondo de la secadora a presión.

- Colocar otro secante para geles empapado en solución salina, seguido de dos secantes absorbentes y la pletina superior de la secadora a presión.

- Colocar la secadora a presión apoyándola sobre el dispositivo y secar el gel a presión durante 10 min.

- Lavar en solución salina fresca durante 10 min.

- Secar de nuevo a presión según el método anterior durante 10 min.

- Colocar el gel en el horno (a 90ºC como máximo) hasta que se seque

- Procesar el gel como sigue:

o solución colorante 3 min.

o solución de ácido acético 2 min.

o solución ácido-alcohol 1 min.

o solución ácido-alcohol 15 segs ( o más, hasta obtener un fondo claro)

o agua desionizada 5 segs.

o Limpiar el exceso de solución

- Colocar el gel en el horno de secado hasta que se seque (a 90ºC como máximo)

- Evaluar el gel

13. Calibrado

No aplicable.

14. Análisis de resultados

Evaluar los geles comparándolos con un patrón de referencia conocido (control).

15. Cálculos

No aplicable.

16. Imprecisión

No aplicable.

17. Límites de referencia

No aplicable.

18. Interferencias

Ninguna conocida.

19. Control de Calidad

Usar una muestra del control.

20. Referencias

1. Chopin N. Exploration biologique des protéinuries. Classification, méthodes d'investigation et interprétation. Spectra Biologie 1993;1:49-53
2. Chopin N, Le Carrer D. Etude de la sélectivité des protéinuries : description d'un nouvel index. Rev Fr Lab 1994;269:103-7
3. Chopin N, Le Carrer D. Exploration biologique des tubulopathies : mise à jour. Rev Fr Lab 1994;269:109-12
4. Le Carrer D, Nicolas A, Ducasse L. L'analyse des protéinuries au laboratoire de biologie en 1992. Rev Fr Lab 1992;245:41-7
5. Le Carrer D, Chopin N. Profil protéique urinaire : proposition d'un protocole d'exploration biologique des protéinuries. Rev Fr Lab 1994;269:29-37
6. Pourignaux F, Brohet M, Louis P, Chevigné R. News methods for detecting and identifying monoclonal and BJ proteins in urine without concentration. Sixth Int Symp of Nephrology, Montecatini Terme, Italy, June 1989
7. Van Hoof V, Chevigné R, Van Campenhout C, Lepoutre L. Evaluation of the Protur/Microprotur system  Beckman-Analis-Belgium for the protein electrophoresis of non-concentrated urine samples. 7ieme Coll Biologie Prospective, Pont à Mousson, 1988

Textos:

B 25 E92 Analysis of Urinary Proteins by Electrophoresis without Concentration.

B 25a E97

B 46 D95 Urinproteinelektrophorese von nicht einkonzentrierten Urinproben.

B 38 F94 L'analyse des protéines urinaires par électrophorèse sans concentration.

B 39 E94 Urinary Proteins analysis by electrophoresis without concentration.

B 39a E96

B 45 D95 Elektrophoretische Urinproteinanalyse ohne Einkonzentrierung.

ANALIS website
This item belongs to the following categories (click to expand):
Prices are quoted in euro (taxes excluded) and apply in the Benelux (recycling fee included). They are subject to change without notice. We reserve the right to adjust pricing errors and to limit quantities.

FOLLOW US ON  FOLLOW US: