Hi, I am an happy lightbox
|
|
|
|
|
|
|
|
++ 32 (0)81 25 50 50
EN | NL | FR LOGIN   
PRODUCTS SECTORS SERVICES BRANDS
PRODUCTS
SECTORS
SERVICES
BRANDS
   
ANALIS

Protur™ B.J. kit for Beckman Coulter Paragon® Electrophoresis - NL: Gebruikershandleiding

QUOTATION
INFORMATION
QUOTATION
INFORMATION
DESCRIPTION
DESCRIPTION

1. General

Datum: 4 sep-03 - Bewerking 01
EURO PN 844111005
PN 10-004080
20 tests per kit

figure 1

2. Gebruik

De kit wordt gebruikt voor de immunofixatie van eiwitten en Bence Jones eiwitten in niet-geconcentreerde urine.

3. Testprincipe

Eiwitten in een elektrisch veld migreren met een verschillende snelheid naar een van de elektrodepolen. De migratie scheidt de eiwitten. Als specifieke antisera zich verbinden met specifieke eiwitten, zal er een antigeen-antilichaam precipitaat ontstaan.

De Protur B.J.™ kit bevat componenten voor de elektroforetische scheiding van eiwitten in niet-geconcentreerde urine in een gebufferde agarosegel.

Na elektroforese wordt er een antiserum aangebracht.

4. Inhoud

Equilibratiebuffer (0.44 mol/L TRISboraat buffer) 1x200mL (PN 10-004061)

Elektroforesebuffer (2.22mol/L TRISboraat buffer) 1x200mL (PN 10-004062)

Protur Kleurstof 1x100mL (PN 10-004064)

Protur Plus antiserum (Anti- IgG,A,M - kappa, -lambda) 3x1.6mL (PN 10-004081)

Bevat natrium azide

Agarosegels: 10

Staaltemplate: 10

Antiserum-template: 10

Maatbeker (25mL) 1x

Template blotters: 10 (19 x 126 mm)

Gel blotters: 50 (83x101mm)

Drying blotters: 40 (76 x 101 mm)

5. Toestelconfiguratie

  • Zie Beckman Coulter's Paragon® Electrophoresis System.

6. Andere vereiste reagentia en benodigdheden

- Pipetten

- Maatcilinder

- Gedistilleerd water

- Zure alcoholoplossing

- Zoutoplossing

- Beckman Coulter's Paragon® Electrophoresis System.

7. Training

De gebruiker moet vertrouwd zijn met Beckman Coulter's Paragon Electrophoresis System.

8. Bereiden en bewaren van de reagentia

Agarosegels: vóór gebruik neemt u voorzichtig een gel uit de folieverpakking. Gels moeten bij kamertemperatuur bewaard worden (18 °C tot 30 °C) tot de houdbaarheidsdatum. Het niet-naleven van de temperatuur- of bewaarcondities kan resulteren in atypische migraties.

BEWAAR DE GELS NIET IN DE BUURT VAN TOESTELLEN DIE WARMTE AFGEVEN; bv. CRT, computer of tafeltoestel. KOEL ZE NIET EN VRIES ZE NIET IN

Protur Plus™ Equilibratiebuffer: GEBRUIKSKLAAR

Protur Plus™ Elektroforesebuffer meng 200mL buffer met 800mL gedesioniseerd water. De buffer is 60 dagen stabiel in een gesloten container.

Protur Plus™ Dye: Kleuroplossing

  • De zure alcoholoplossing aanmaken: 500 mL gedesioniseerd water, 300 mL methanol, 200 mL azijnzuur.
  • Meng 100 mL kleurstof met 200 mL zure alcoholoplossing.

Zoutoplossing

8.5 g NaCl in 1 L gedesioniseerd water.


Bewaar de reagentia bij kamertemperatuur

9. Type specimen


Gebruik verse ongeconcentreerde urine.


10. Opstellen van de apparatuur

Zie Paragon® Electrophoresis System.

Plaats het volgende in de spoel verwerkingseenheid:

  • recipiënt 1: kleuroplossing

  • recipiënt 2: gedesioniseerd water

  • recipiënt 3: zure alcoholoplossing

  • recipiënt 4: zure alcoholoplossing

  • recipiënt 5: gedesioniseerd water

HERBRUIKBAAR VOOR 10 GELS

11. Staalvoorbereiding

Vers urinestaal

12. Gebruiksaanwijzingen

Equilibratie

  • Blot de gel en giet 20 mL equilibratiebuffer in het gelschaaltje.
  • Plaats de gel, met de agarosekant naar beneden, op de vloeistof.
  • Wacht 30 minuten (recipiënt niet sluiten)

Toepassing

  • Blot de gel
  • Plaats de staaltemplate
  • Pipetteer een staal van 5 µl
  • Wacht 5 minuten
  • Druk met de vingertoppen voorzichtig op de template blotter
  • Blotter en template wegwerpen

Elektroforese

  • Giet 45 mL elektroforesebuffer in elk compartiment van de cel
  • Plaats de gel op de drager
  • Voer gedurende 35 minuten een scheiding uit bij 100 V

Detectie

  • Blot de gel
  • Plaats de antiserum-template
  • Breng 80 µL antiserum aan
  • Plaats de gel in de incubatiekamer
  • Sluit de kamer en incubeer gedurende 30 min. op kamertemperatuur
  • Verwijder de gel, plaats hem in de gelhouder en spoel hem 10 min. in de zoutoplossing.
  • Plaats de gel op de basis van de persdroger (agarosekant naar boven)
  • Plaats een tweede met zoutoplossing bevochtigde gel blotter op het geloppervlak, gevolgd door 2 droogblotters en de persdroger-bovenplaat. Druk gedurende 10 min. droog.
  • Herhaal de vorige stap
  • Plaats de gel in de houder en veeg overtollige oplossing weg
  • Laat de gel drogen in de oven (maximum 90 °C)
  • Behandel de gel met:
  • Kleuroplossing 3 min.
  • Gedesioniseerd water 2 min.
  • Zure alcoholoplossing 1 min.
  • Zure alcoholoplossing 15 sec. (of nog langer tot er een heldere achtergrond is)
  • Gedesioniseerd water 5 sec.
  • Veeg overtollige oplossing weg
  • Plaats de gel in de droogoven om te drogen (max. 90°C)
  • Evalueer de gel

13. Kalibratie

Niet van toepassing

14. Analyse van de resultaten

figure 2

Evalueer de gels op precipitaat

15. Berekening

Niet nodig

16. Onnauwkeurigheid

Niet van toepassing

17. Referentiebereik

Niet van toepassing

18. Interferentie

Niet gekend.

19. Kwaliteitscontrole

Gebruik een urinecontrolestaal.

20. Referenties

1. Chopin N. Exploration biologique des protéinuries. Classification, méthodes d'investigation et interprétation. Spectra Biologie 1993;1:49-53
2. Chopin N, Le Carrer D. Etude de la sélectivité des protéinuries : description d'un nouvel index. Rev Fr Lab 1994;269:103-7
3. Chopin N, Le Carrer D. Exploration biologique des tubulopathies : mise à jour. Rev Fr Lab 1994;269:109-12
4. Le Carrer D, Nicolas A, Ducasse L. L'analyse des protéinuries au laboratoire de biologie en 1992. Rev Fr Lab 1992;245:41-7
5. Le Carrer D, Chopin N. Profil protéique urinaire : proposition d'un protocole d'exploration biologique des protéinuries. Rev Fr Lab 1994;269:29-37
6. Pourignaux F, Brohet M, Louis P, Chevigné R. News methods for detecting and identifying monoclonal and BJ proteins in urine without concentration. Sixth Int Symp of Nephrology, Montecatini Terme, Italy, June 1989
7. Van Hoof V, Chevigné R, Van Campenhout C, Lepoutre L. Evaluation of the Protur/Microprotur system  Beckman-Analis-Belgium for the protein electrophoresis of non-concentrated urine samples. 7ieme Coll Biologie Prospective, Pont à Mousson, 1988

Brochures:

B 25 E92 Analysis of Urinary Proteins by Electrophoresis without Concentration.

B 25a E97

B 46 D95 Urinproteinelektrophorese von nicht einkonzentrierten Urinproben.

B 38 F94 L'analyse des protéines urinaires par électrophorèse sans concentration.

B 39 E94 Urinary Proteins analysis by electrophoresis without concentration.

B 39a E96

B 45 D95 Elektrophoretische Urinproteinanalyse ohne Einkonzentrierung.

ANALIS website
This item belongs to the following categories (click to expand):
Prices are quoted in euro (taxes excluded) and apply in the Benelux (recycling fee included). They are subject to change without notice. We reserve the right to adjust pricing errors and to limit quantities.

FOLLOW US ON  FOLLOW US: