Hi, I am an happy lightbox
|
|
|
|
|
|
|
|
++ 32 (0)81 25 50 50
EN | NL | FR LOGIN   
PRODUCTS SECTORS SERVICES BRANDS
PRODUCTS
SECTORS
SERVICES
BRANDS
   
ANALIS

CEofix™ HbA2 kit for Beckman Coulter P/ACE™ MDQ series - DE: Gebrauchsanweisung

QUOTATION
INFORMATION
QUOTATION
INFORMATION
DESCRIPTION DOWNLOADS
DESCRIPTION

100 Tests pro Kit

1. Datum: 7-Dec-03 - Revision: 01

figure 1

2. Beabsichtigte Verwendung:

Das Kit dient der quantitativen Bestimmung von Humanhämoglobin A2 (HbA2), Bestimmung von Hämoglobin F und Hämoglobin-Varianten. Für Hämoglobin-Varianten sollte das Kit zusammen mit dem CEofix™ HbA1c Kit verwendet werden.


3. Testprinzip:

Das Hämoglobin wird innerhalb des Kapillargefässes unter Einwirkung eines elektrischen Feldes getrennt. Unterschiede im Chargen-Masse-Verhältnis ergeben verschiedene Migrationszeiten.

Ein UV-Detektor dient der Entdeckung von Hb bei 415nm.

Das Kit setzt sich aus Pufferbasen und Methode zusammen. Die Pufferbasen nutzen die patentierte dynamische Zweischichtentechnik.

Der Prozentsatz von HbA2 wird als Prozentsatz der HbA2-Fraktion im Verhältnis zu der Summe aller Hämoglobinfraktionen definiert.

4. Inhalt:

Lot nr. 050315 und höher

Spüler:
1 x 45 mL aqua bidistillata (PN 10-004713)
Weichspüler:
1x 20mL NaOH 0,2 M (PN 10-004711)
Initiator:
1x 15 mL Apfelsäure, Arginin pH 4,6 (PN 10-004714)
Pufferbase:
1 x 45 mL Taurin/Arginin pH 8,9 (PN 10-004712)
Hämolyser:
1 x 15 mL Taurin/Arginin pH 9,0 (PN 10-004715)

Lot nr. 031205

Spüler:
1 x 10 mL aqua bidistillata (PN 10-004713)
Weichspüler:
1x 10mL NaOH 0,2 M (PN 10-004711)
Initiator:
1x 3 mL Apfelsäure, Arginin pH 4,6 (PN 10-004714)
Pufferbase:
1 x 10 mL Taurin/Arginin pH 8,9 (PN 10-004712)
Hemolyser:
1 x 15 mL Taurin/Arginin pH 9,0 (PN 10-004715)

5. Konfiguration des Instruments:


- BeckmanCoulter P/ACE MDQ

  • UV Detektor mit 415 nm Filter (PN: 10-004709)
  • Musterkühloption
  • P/ACE 32 Karat Software Version 5.0

(Konfiguration ohne CAESAR-Integration nutzen)

6. Anderes benötigtes Material:


- Phiolen 2 mL (PN 144980)

  • Schutzkappen (PN 144648)
  • Mikrotiterplatte
  • Montage leerer Patronen 100 x 800 µm (PN 144738)
  • Pipetten
  • Kapillargefäss 25 µM ID x 10 cm in den Detektor 31 cm Gesamtlänge (PN 10-004748/844111023)


7. Schulung:

Das Bedienungspersonal sollte mit der Bedienung und Wartung des Instruments (P/ACE MDQ) vertraut sein.

8. Reagens Vorbereitung und Lagerung:



Reagens sind klar zum Gebrauch. Kit und Pufferbasen bis zum Verfalldatum in geschlossenem Behälter zwischen 8°C und 30°C lagern.

Setzen Sie jeden Tages frisches Spülen, -conditioner, -initiator und -puffer in saubere Phiolen ein.

Falls das Kit beschädigt geliefert wurde, sollte ein Ersatzkit angefordert werden.

Das Kit enthält keine gefährlichen Bestandteile.

9. Mustertyp:

Biologische Flüssigkeiten sollten mit der allgemein üblichen Methode für klinische Labortests gesammelt werden.

Vollblut-Hämolysat ist als Muster zu bevorzugen

10. Vorbereitung des Instruments:

Das Instrument wie folgt aufladen

figure 2

Programmierung des Instruments

figure 3

oder Programm: HbA2_meth_96well_plate.met herunterladen.

Kapillargefäβenden abbrennen, um eine Polyimidschicht auf 2mm zu vermeiden.

11. Musterpräparation:

Muster: 150 µL Hämolyser + 30 µL gut gemischten Vollblutes auf eine Mikrotiterplatte geben und schütteln.

figure 4

12. Betrieb:

Täglich vorzunehmende Handlungen:

  • Instrument und Interphasenverteiler reinigen
  • Spüler, Weichspüler, Initiator, Pufferbasen, Phiolen anbringen
  • Pufferphiolen mit sauberen und trockenen Kappen versehen
  •  cond.met fahren wenn das System für mehrere Tage ausfiel

figure 5

- Muster präparieren

- Muster in das Instrument geben

-  HbA2_meth_96well_plate.met Methode fahren

Am Ende des Tages:

- Muster entfernen

- Pufferphiolen entfernen

Anbringen neuer Kapillargefässe

- Wenn das Kapillargefäss gebrochen ist oder nicht richtig arbeitet,
ist es gemäβ dem Instrumentenhandbuch zu ersetzen.

-  cond.met" zur Konditionierung fahren

13. Kalibration:

Für dieses Kit ist keine Kalibration notwendig.

Das Instrument ist gemäβ den Vorgaben von Beckman Coulter zu warten und zu kalibrieren.

14. Analyse der Ergebnisse:

Hier klicken für Beispiele und für Position des Varianten.

Click to see examples.

15. Berechnung:

% CDT = Summe von % 0-Sialo Tf plus % von 2-Sialo Tf.

% X-Sialo Tf = korrigierter Bereich von X-Sialo Tf im Verhältnis zur Summe aller Tf-Isoformen.

(X= 0, 2, 3, 4, 5 oder 6).


16. Ungenauigkeiten:

HbA2 Migration Time HbA2
mean: 6.08 min
Migration Time HbA
mean: 6.60
% HbA2
mean 2.82
Within-run assay (N=46) %CV

0.74 0.73 3.34

17. Referenzbereich:

Jedes Labor hat seinen eigenen Referenzbereich festzulegen, um der Patientenpopulation gerecht zu werden.

figure 6

HbF < 1%

18. Interferenzen:
  • Das Vorhandensein von Hämoglobin Varianten schränkt die Bestimmung von HbA2 ein.
  • Zur Bestimmung von Hämoglobin-Varianten sollte das Kit zusammen mit dem CEofix HbA1c Kit verwendet werden.

19. Qualitätskontrolle

Gepooltes Kontrollserum oder im Handel erhältliche Kontrolle sollte jedem Programmlauf beigefügt werden.

20. Referenzen:

1. Cotton F, Lin C, Fontaine B, Gulbis B, Janssens J, Vertongen F. Evaluation of a Capillary
Electrophoresis Method for Routine Determination of Hemoglobins A2 and F. Clin Chem
1999;45:237-43
2. Lin C, Cotton F, Fontaine B, Gulbis B, Janssens J, Vertongen F. Capillary zone electrophoresis: an
additional technique for identification of hemoglobin variants. Hemoglobin 1999;23:97-109
3. Gerritsma J, Sinnige D, Drieze C, Sittrop B, Houtsma P, Hulshorst-Jansen N and Huisman W.
Quantitative and qualitative analysis of haemoglobin variants using capillary zone
electrophoresis. Ann Clin Biochem 2000;37:380-9
4. Mario N, Baudin B, Bruneel A, Janssens J, Vaubourdolle M. Capillary Zone Electrophoresis for
the Diagnosis of Congenital Hemoglobinopathies. Clin Chem 1999;45:285-8
Bibliography
1. Castagnola M, Messana I, Cassiano L, Rabino R, Rossetti D, Giardina B. The use of capillary
electrophoresis for the determination of hemoglobin variants. Electrophoresis 1995;16:1492-8
2. Hempe J, Craver R. Quantification of hemoglobin variants by capillary isoelectric focusing. Clin
Chem 1994;40:2288-95
3. Hempe J, Granger J, Craver R. Capillary isoelectric focusing of hemoglobin variants in the
pediatric clinical laboratory. Electrophoresis 1997;18:1785-95
4. Hempe J, Granger J, Warrier R, Craver R. Analysis of hemoglobin variants by capillary
isoelectric focusing. J Cap Elec 1997;4:131-5
5. Hempe J, Craver R. Separation of hemoglobin variants with similar charge by capillary
isoelectric focusing : Value of isoelectric point for identification of common and uncommon
hemoglobin variants. Electrophoresis 2000;21:743-48
6. Jenkins M, Hendy J, Smith I. Evaluation of hemoglobin A2 quantification assay and hemoglobin
variant screening by capillary electrophoresis. J Cap Elec 1997;004:137-43
7. Landers J. Clinical capillary electrophoresis. Clin Chem 1995;41:495-509
8. Lin C, Gulbis B, Delobbe E, Cotton F, Vertongen F. Separation of human globin chains by
micellar electrokinetic capillary chromatography. J Chromatogr B 1998;719:47-54
9. Lukens J, Lee R. Hereditary disorders affecting hemoglobin structure and synthesis. Wintrobe's
Clinical Hematology, Ninth Edition 1993;1:1023-145
10. Mario N, Baudin B, Aussel C, Giboudeau J. Capillary isoelectric focusing and high-performance
cation-exchange chromatography compared for qualitative and quantitative analysis of
hemoglobin variants. Clin Chem 1997;43:2137-42
11. Mohammad A et al. Clinical application of capillary isoelectric focusing on fused silica capillary
for determination of hemoglobin variants. Clin Chem 1997;43:1798-9
12. Molteni S, Frischknecht H, Thormann W. Application of dynamic capillary isoelectric focusing to
the analysis of human hemoglobin variants. Electrophoresis 1994;15:22-30
13. Oda R, Clark R, Katzmann J, Landers J. Capillary electrophoresis as a clinical tool for the
analysis of protein in serum and other body fluids. Electrophoresis 1997;18:1715-23
14. Ong C, Liau L, Ong H. Separation of globins using free zone capillary electrophoresis. J
Chromatogr 1992;576:346-50
15. Shihabi Z, Hinsdale M, Daugherty H. Hemoglobin A2 quantification by capillary zone
electrophoresis. Electrophoresis 2000;21:749-52
16. Sugano M et al. Analysis of hemoglobin and globin chain variants by a commonly used capillary
isoelectric focusing method. Electrophoresis 2000;21:3016-9.
17. Weykamp C, Penders T, Muskiet F, van der Slik W. Influence of hemoglobin variants and
derivatives on glycohemoglobin determinations, as investigated by 102 laboratories using 16
methods. Clin Chem 1993;39:1717-23

DOWNLOADS
ANALIS website
This item belongs to the following categories (click to expand):
Prices are quoted in euro (taxes excluded) and apply in the Benelux (recycling fee included). They are subject to change without notice. We reserve the right to adjust pricing errors and to limit quantities.

FOLLOW US ON  FOLLOW US: