Hi, I am an happy lightbox
|
|
|
|
|
|
|
|
++ 32 (0)81 25 50 50
EN | NL | FR LOGIN   
PRODUCTS SECTORS SERVICES BRANDS
PRODUCTS
SECTORS
SERVICES
BRANDS
   
ANALIS

CEofix™ HbA2 kit for Beckman Coulter P/ACE™ MDQ series - NL: Gebruikershandleiding

QUOTATION
INFORMATION
QUOTATION
INFORMATION
DESCRIPTION DOWNLOADS
DESCRIPTION

100 tests per kit

1. Datum: 7-May-03 - Revisie: 01

figure 1

2. Voorzien gebruik:

De kit is voorzien voor de kwantitatieve bepaling van humaan hemoglobine A2 (HbA2), de bepaling van hemoglobine F en hemoglobine varianten. Voor hemoglobine vairanten moet de kit in combinatie met de CEofix™ HbA1c kit gebruikt worden.


3. Testprincipe:

De hemoglobines worden in een capillair onder de werking van een elektrisch veld gescheiden. Verschillen in de lading-massa verhouding resulteren in verschillende migratietijden.

Men gebruikt een UV detector met detectie van de hemoglobine op 415 nm.

De kit bestaat uit buffers en instructies. De buffers gebruiken de gepatenteerde techniek van de dubbele dynamische coating.

De % HbA2 wordt gedefinieerd als het percentage van de HbA2 fractie in verhouding tot de som van alle hemoglobine fracties.

4. Inhoud:

Voor lot nr. 050315 en hoger

Spoeloplossing:
1 x 450 ml dubbel gedestilleerd water
(PN 10-004713)
Conditioner:
1x 20ml NaOH 0.2 M (PN 10-004711)
Initiator:
1x 15 ml Malic, Arginine pH 4.6 (PN 10-004714)
Buffer:
1 x 45 ml Taurine/ Arginine pH 8.9 (PN 10-004712)
Hemolyser:
1 x 15 ml Taurine/Arginine pH 9.0 (PN 10-004715)

Voor lot nr. 031205

Spoeloplossing:
1 x 10 ml dubbel gedestilleerd water (PN 10-004713)
Conditioner:
1x 10ml NaOH 0.2 M (PN 10-004711)
Initiator:
1x 3 ml Malic, Arginine pH 4.6 (PN 10-004714)
Buffer:
1 x 10 ml Taurine/ Arginine pH 8.9 (PN 10-004712)
Hemolyser:
1 x 15 ml Taurine/Arginine pH 9.0 (PN 10-004715)

5. Configuratie van het instrument:


- Beckman Coulter P/ACE MDQ

  • UV detector met 415 nm filter (PN: 10-004709)
  • Optie : staalkoeling
  • P/ACE 32 Karat software versie 5.0

(gebruik configuratie zonder CAESAR integratie)

6. Verder materiaal:


- Flesjes 2 ml (PN 144980)

  • Afsluitdekseltjes (PN 144648)
  • microtiterplaat
  • Blank Cartridge assembly 100 x 800 µm (PN 144738)
  • Pipetten
  • Capillair 25 µM ID x 10 cm naar de detector 31 cm totale lengte (PN 10-004748/844111023)


7. Opleiding:

De technicus moet de werking en het onderhoud van het instrument kennen (P/ACE MDQ).

8. Bereiding en bewaren van de reactieven:



De reactieven zijn klaar voor gebruik. Bewaar kit en buffers, in dichte containers, tussen 8°C en 30°C tot de vervaldatum.

Dagelijks moeten de buffer flesjes evenals spoelvloeistof, conditionner en intitiator vervangen worden.

Mocht een kit beschadigd aankomen, gelieve een vervanging van de kit aan te vragen

De kit bevat geen gevaarlijke stoffen.

9. Type staal:

De biologische vloeistoffen worden zoals gebruikelijk voor testen in klinische laboratoria verworven.

Men gebruikt bij voorkeur een hemolysaat van totaal bloed.

10. Voorbereiding van het instrument:

Laad het instrument als volgt

figure 2

Programmering van het instrument

figure 3

Of download het programma: HbA2_meth_96well_plate.met

2 mm van de uiteinden van het capillair in de vlam houden om de polyimide coating te verwijderen.

11. Staalvoorbereiding:

Staal: 150 µL hemolyser + 30 µL goed gemengd totaal bloed in een microtiterplaat en mengen.

figure 4

12. Handelingen:

Iedere dag:

  • reinig het instrument en de interface manifold
  • plaats de flesjes voor de spoeloplossing, conditioner, initiator en buffer
  • plaats nieuwe en droge dekseltjes op de bufferflesjes
  • run cond.met
    als het systeem meerdere dagen niet gebruikt is

figure 5

- de stalen voorbereiden

- plaats het staal in het instrument

- run methode  HbA2_meth_96well_plate.met

Einde van de dag:

- de stalen uit het instrument nemen

- verwijder de bufferflesjes

Nieuw capillair plaatsen

- Als het capillair stuk is of niet goed werkt, het capillair vervangen volgens de instructies van het instrument.

- run  cond.met" voor nieuwe conditionering van het instrument.

13. Kalibreren:

De kit hoeft niet gekalibreerd te worden.

Het instrument moet onderhouden en gekalibreerd worden volgens de Beckman Coulter specificaties.

14. Analyse van de resultaten:

Klik voor voorbeelden.

Click to see examples.

15. Berekeningen:

% HbA2 = gecorrigeerde oppervlakte van de HbA2 fractie in verhouding tot de som van gecorrigeerde oppervlaktes van alle hemoglobine fracties.


16. Onnauwkeurigheid:

HbA2 Migration Time HbA2
mean: 6.08 min
Migration Time HbA
mean: 6.60
% HbA2
mean 2.82
Within-run assay (N=46) %CV

0.74 0.73 3.34

17. Referentiebereik:

Ieder laboratorium moet zijn eigen referentiebereik vastleggen, naargelang de patientenbevolking.

figure 6

HbF < 1%

18. Interferenties:
  • De aanwezigheid van hemoglobine varianten begrenst de bepaling van HbA2.
  • Voor de bepaling van hemoglobine varianten moet de kit in combinatie met
    de CEofix HbA1c kit gebruikt worden.

19. Quality Control:

Een controle serum moet gedurende iedere run gebruikt worden.

20. Referenties:

1. Cotton F, Lin C, Fontaine B, Gulbis B, Janssens J, Vertongen F. Evaluation of a Capillary
Electrophoresis Method for Routine Determination of Hemoglobins A2 and F. Clin Chem
1999;45:237-43
2. Lin C, Cotton F, Fontaine B, Gulbis B, Janssens J, Vertongen F. Capillary zone electrophoresis: an
additional technique for identification of hemoglobin variants. Hemoglobin 1999;23:97-109
3. Gerritsma J, Sinnige D, Drieze C, Sittrop B, Houtsma P, Hulshorst-Jansen N and Huisman W.
Quantitative and qualitative analysis of haemoglobin variants using capillary zone
electrophoresis. Ann Clin Biochem 2000;37:380-9
4. Mario N, Baudin B, Bruneel A, Janssens J, Vaubourdolle M. Capillary Zone Electrophoresis for
the Diagnosis of Congenital Hemoglobinopathies. Clin Chem 1999;45:285-8
Bibliography
1. Castagnola M, Messana I, Cassiano L, Rabino R, Rossetti D, Giardina B. The use of capillary
electrophoresis for the determination of hemoglobin variants. Electrophoresis 1995;16:1492-8
2. Hempe J, Craver R. Quantification of hemoglobin variants by capillary isoelectric focusing. Clin
Chem 1994;40:2288-95
3. Hempe J, Granger J, Craver R. Capillary isoelectric focusing of hemoglobin variants in the
pediatric clinical laboratory. Electrophoresis 1997;18:1785-95
4. Hempe J, Granger J, Warrier R, Craver R. Analysis of hemoglobin variants by capillary
isoelectric focusing. J Cap Elec 1997;4:131-5
5. Hempe J, Craver R. Separation of hemoglobin variants with similar charge by capillary
isoelectric focusing : Value of isoelectric point for identification of common and uncommon
hemoglobin variants. Electrophoresis 2000;21:743-48
6. Jenkins M, Hendy J, Smith I. Evaluation of hemoglobin A2 quantification assay and hemoglobin
variant screening by capillary electrophoresis. J Cap Elec 1997;004:137-43
7. Landers J. Clinical capillary electrophoresis. Clin Chem 1995;41:495-509
8. Lin C, Gulbis B, Delobbe E, Cotton F, Vertongen F. Separation of human globin chains by
micellar electrokinetic capillary chromatography. J Chromatogr B 1998;719:47-54
9. Lukens J, Lee R. Hereditary disorders affecting hemoglobin structure and synthesis. Wintrobe's
Clinical Hematology, Ninth Edition 1993;1:1023-145
10. Mario N, Baudin B, Aussel C, Giboudeau J. Capillary isoelectric focusing and high-performance
cation-exchange chromatography compared for qualitative and quantitative analysis of
hemoglobin variants. Clin Chem 1997;43:2137-42
11. Mohammad A et al. Clinical application of capillary isoelectric focusing on fused silica capillary
for determination of hemoglobin variants. Clin Chem 1997;43:1798-9
12. Molteni S, Frischknecht H, Thormann W. Application of dynamic capillary isoelectric focusing to
the analysis of human hemoglobin variants. Electrophoresis 1994;15:22-30
13. Oda R, Clark R, Katzmann J, Landers J. Capillary electrophoresis as a clinical tool for the
analysis of protein in serum and other body fluids. Electrophoresis 1997;18:1715-23
14. Ong C, Liau L, Ong H. Separation of globins using free zone capillary electrophoresis. J
Chromatogr 1992;576:346-50
15. Shihabi Z, Hinsdale M, Daugherty H. Hemoglobin A2 quantification by capillary zone
electrophoresis. Electrophoresis 2000;21:749-52
16. Sugano M et al. Analysis of hemoglobin and globin chain variants by a commonly used capillary
isoelectric focusing method. Electrophoresis 2000;21:3016-9.
17. Weykamp C, Penders T, Muskiet F, van der Slik W. Influence of hemoglobin variants and
derivatives on glycohemoglobin determinations, as investigated by 102 laboratories using 16
methods. Clin Chem 1993;39:1717-23

DOWNLOADS
ANALIS website
This item belongs to the following categories (click to expand):
Prices are quoted in euro (taxes excluded) and apply in the Benelux (recycling fee included). They are subject to change without notice. We reserve the right to adjust pricing errors and to limit quantities.

FOLLOW US ON  FOLLOW US: