Hi, I am an happy lightbox
|
|
|
|
|
|
|
|
++ 32 (0)81 25 50 50
EN | NL | FR LOGIN   
PRODUCTS SECTORS SERVICES BRANDS
PRODUCTS
SECTORS
SERVICES
BRANDS
   
ANALIS

HS CEofix™ HbA2 kit for Beckman Coulter P/ACE™ 5000 series - IT: Istruzioni per l'uso

QUOTATION
INFORMATION
QUOTATION
INFORMATION
DESCRIPTION TECHNICAL DESCR.
DESCRIPTION

100 tests per kit

1. Data: 7-May-03-Revisione 01

2. Finalità di utilizzo:

Il kit è indicato per la determinazione quantitativa dell'emoglobina umana A2 (HbA2), la determinazione dell'emoglobina F e delle varianti di emoglobina. Per le varianti di emoglobina il kit deve essere usato in combinazione con il kit CEofix™ HbA1c ((PN 10-004180/844111025).


3. Principio del test:

Le emoglobine vengono separate, all'interno di un capillare, dall'influsso di un campo elettrico. Le differenti proporzioni di carica e massa producono tempi diversi di migrazione.

Viene impiegato un rilevatore a raggi UV che misura i Hb a 415nm.

Il kit è composto da tamponi e procedure. I tamponi utilizzano la tecnica brevettata del doppio rivestimento dinamico.

La % di HbA2 è definite come la percentuale della frazione di HbA2 in relazione alla somma di tutte le frazioni di emoglobina.

4. Contenuto:

Risciacquo:1 x 100 ml acqua bidistallata (PN 10-004183)

Condizionatore:1 x 100 ml NaOH 0.2 M (PN 10-004181)

Iniziatore:1 x 2,5 ml soluzione acquosa (PN 10-004194)

Tampone:4 x 4,2 ml Arginina Taurina pH 8.9 (PN 10-004192)

Emolizzatore:1 x 5,2 ml Arginina (PN 10-004195)

Micro fiale:130

5. Configurazione dello strumento:


- BeckmanCoulter P/ACE 5000

- Rilevatore UV con filtro 415 nm (PN: 10-004709)

- Software P/ACE versione 1.0.

6. Altro materiale necessario:


- Fiale (PN 358807)

- Tappi (PN 359079)

- Spring (PN338488)

- Cartuccia 100 x 800 µm ( PN 727610)

- Pipette

- Capillare 25µM ID x 20 cm al rilevatore, 31 cm lunghezza totale (PN 10-004188/844111023)


7. Formazione:

L'operatore deve avere dimestichezza sia nell'operare con lo strumento (P/ACE 5000) sia nella sua manutenzione.

8. Preparazione dei reagenti e stoccaggio:

I reagenti sono pronti all'uso. Conservare il kit e i tamponi, in una confezione chiusa, tra i 8 e i 30°C non oltre la data di scadenza.

Tra un'operazione e l'altra le fiale buffer devono essere tappate per evitare l'evaporazione.

Qualora pervenga un kit danneggiato si raccomanda di richiederne la sostituzione.

Il kit non contiene componenti pericolosi.

9. Tipologia di campione:

I fluidi biologici devono essere raccolti con le metodologie normalmente usate per ogni test di laboratorio clinico.

Il campione più indicato è il sangue intero emolizzato.

10. Preparazione dello strumento:

Caricare lo strumento come segue

figure 1

Programmazione dello strumento

figure 2

Montaggio del capillare

figure 3

Bruciare l'estremità del capillare per eliminare il rivestimento in poliimmide 2 mm.

11. Preparazione del campione:

Campione: versare 50 µl di emolizzatore + 10 µl di sangue intero ben mescolato in una microfiala e mescolare.

figure 4

12. Operazioni:

Operazioni giornaliere:

- pulire lo strumento e inserire il collettore

- immettere un nuovo risciacquo, condizionatore, iniziatore, fiale tampone  inserire una nuova fiala di scarico

- chiudere le fiale tampone con tappi puliti e asciutti

- lanciare  cond1.met quando il sistema non è stato in funzione per diversi giorni

- preparare i campioni

- posizionare il campione nello strumento

- lanciare  HbA2.met

Fine giornata:

-rimuovere i campioni

- tappare le fiale tampone

Sostituzione del capillare

-Sostituire il capillare quando questi è rotto o presenta malfunzionamenti: seguire il manuale.

-lanciare  cond1.met per condizionamento

13. Calibratura:

Il kit non necessita di alcuna taratura.

Lo strumento deve essere calibrato e conservato secondo quanto specificato da Beckman Coulter.

14. Analisi dei risultati:

Clicca per vedere alcuni esempi.

15. Calcolo:


% HbA2 = area corretta della frazione di HbA2 in relazione con la somma delle aree corrette di tutte le frazioni di emoglobina

16. Imprecisioni:

Imprecision

HbA2 HbA2 (2.9%) MT A2 (4.7 min)
Within-assay (N=20) %CV 1.4 2.3
Between-run (N=20 days) %CV 1.8 2.9

Analis May 1998

Correlation

figure 5

Fig. Comparison of Hb A2 quantification.
CZE and MAEC results (n 5 57); ( B), CZE and HPLC results (n 5 57)
Hb A2 CZE (%) = 1.233 Hb A2 HPLC - 0.2

figure 6

Fig. Comparison of Hb F values obtained with HPLC and CZE.
Hb FCZE (%) = 1.118 Hb FHPLC + 0.4

F. Cotton et al.: Clinical Chemistry 45, No. 2, 1999

17. Range di riferimento:

Ogni laboratorio dovrebbe stabilire un proprio range di riferimento conformemente alla popolazione di pazienti.

HbA2:

figure 7

HbF:

figure 8

18. Interferenze:

- La presenza delle varianti di emoglobina limiterà la determinazione di HbA2.

-Per la determinazione delle varianti di emoglobina il kit dovrebbe essere utilizzato in combinazione con il kit CEofix HbA1c.

19. Controllo Qualità:

Il controllo integrato fornito o altro controllo disponibile sul mercato deve essere incluso in ogni programma.

20. Referenze:

1 Cotton F, Lin C, Fontaine B, Gulbis B, Janssens J, Vertongen F. Evaluation of a Capillary

Electrophoresis Method for Routine Determination of Hemoglobins A2 and F. Clin Chem

1999;45:237-43

2 Lin C, Cotton F, Fontaine B, Gulbis B, Janssens J, Vertongen F. Capillary zone electrophoresis: an

additional technique for identification of hemoglobin variants. Hemoglobin 1999;23:97-109

3 Gerritsma J, Sinnige D, Drieze C, Sittrop B, Houtsma P, Hulshorst-Jansen N and Huisman W.

Quantitative and qualitative analysis of haemoglobin variants using capillary zone

electrophoresis. Ann Clin Biochem 2000;37:380-9

4 Mario N, Baudin B, Bruneel A, Janssens J, Vaubourdolle M. Capillary Zone Electrophoresis for

the Diagnosis of Congenital Hemoglobinopathies. Clin Chem 1999;45:285-8

Bibliography

1 Castagnola M, Messana I, Cassiano L, Rabino R, Rossetti D, Giardina B. The use of capillary

electrophoresis for the determination of hemoglobin variants. Electrophoresis 1995;16:1492-8

2 Hempe J, Craver R. Quantification of hemoglobin variants by capillary isoelectric focusing. Clin

Chem 1994;40:2288-95

3 Hempe J, Granger J, Craver R. Capillary isoelectric focusing of hemoglobin variants in the

pediatric clinical laboratory. Electrophoresis 1997;18:1785-95

4 Hempe J, Granger J, Warrier R, Craver R. Analysis of hemoglobin variants by capillary

isoelectric focusing. J Cap Elec 1997;4:131-5

5 Hempe J, Craver R. Separation of hemoglobin variants with similar charge by capillary

isoelectric focusing : Value of isoelectric point for identification of common and uncommon

hemoglobin variants. Electrophoresis 2000;21:743-48

6 Jenkins M, Hendy J, Smith I. Evaluation of hemoglobin A2 quantification assay and hemoglobin

variant screening by capillary electrophoresis. J Cap Elec 1997;004:137-43

7 Landers J. Clinical capillary electrophoresis. Clin Chem 1995;41:495-509

8 Lin C, Gulbis B, Delobbe E, Cotton F, Vertongen F. Separation of human globin chains by

micellar electrokinetic capillary chromatography. J Chromatogr B 1998;719:47-54

9 Lukens J, Lee R. Hereditary disorders affecting hemoglobin structure and synthesis. Wintrobe's

Clinical Hematology, Ninth Edition 1993;1:1023-145

10 Mario N, Baudin B, Aussel C, Giboudeau J. Capillary isoelectric focusing and high-performance

cation-exchange chromatography compared for qualitative and quantitative analysis of

hemoglobin variants. Clin Chem 1997;43:2137-42

11 Mohammad A et al. Clinical application of capillary isoelectric focusing on fused silica capillary

for determination of hemoglobin variants. Clin Chem 1997;43:1798-9

12 Molteni S, Frischknecht H, Thormann W. Application of dynamic capillary isoelectric focusing to

the analysis of human hemoglobin variants. Electrophoresis 1994;15:22-30

13 Oda R, Clark R, Katzmann J, Landers J. Capillary electrophoresis as a clinical tool for the

analysis of protein in serum and other body fluids. Electrophoresis 1997;18:1715-23

14 Ong C, Liau L, Ong H. Separation of globins using free zone capillary electrophoresis. J

Chromatogr 1992;576:346-50

15 Shihabi Z, Hinsdale M, Daugherty H. Hemoglobin A2 quantification by capillary zone

electrophoresis. Electrophoresis 2000;21:749-52

16 Sugano M et al. Analysis of hemoglobin and globin chain variants by a commonly used capillary

isoelectric focusing method. Electrophoresis 2000;21:3016-9.

17 Weykamp C, Penders T, Muskiet F, van der Slik W. Influence of hemoglobin variants and

derivatives on glycohemoglobin determinations, as investigated by 102 laboratories using 16

methods. Clin Chem 1993;39:1717-23

TECHNICAL DESCR.
ANALIS website
This item belongs to the following categories (click to expand):
Prices are quoted in euro (taxes excluded) and apply in the Benelux (recycling fee included). They are subject to change without notice. We reserve the right to adjust pricing errors and to limit quantities.

FOLLOW US ON  FOLLOW US: